液態(tài)氮氣,氣化為氮氣,的冷凍效果,在醫(yī)療科研上有廣泛的應(yīng)用。液氮冷凍培養(yǎng)菌種有很好的效果。其主要方法如下:
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液氮冷凍培養(yǎng)菌種的過程:欲用液態(tài)氮保存的繭種將其在適宜培養(yǎng)基適溫培養(yǎng)至靜IL期前期,生芽孢的菌應(yīng)培養(yǎng)個形成成熟的芽孢為止:取試管或flnl生長好的培養(yǎng)物剛無菌生理鹽水洗下細(xì)胞制成懸液.寸入·九閑鳳竹叫’使之細(xì)胞分散均勻。再加等量的保護(hù)劑(甘油20%或10%DMSO),再允分混㈠。懸液制得后無菌地分裝入巳滅菌容量為2ml的安瓿,每安瓿瓶分裝0.5ml。然后進(jìn)行凍結(jié)和保存‘使菌種經(jīng)超低溫保存后需使用時從液態(tài)氮氣冰箱取出使用前需經(jīng)解凍及復(fù)蘇培養(yǎng)-解凍需采取快速加溫,將盛有凍結(jié)樣品的安瓿取出后立即放置38。C恒溫水浴真-I,在具:1’搖動3~5min便可融化、復(fù)蘇培養(yǎng)即將解凍后的細(xì)胞接種于該細(xì)菌適宜的斜面培養(yǎng)基上適溫培養(yǎng)即可。
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