奶牛性控凍精使用技術(shù)操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)：性別控制，是指雌性動(dòng)物通過人為地干預(yù)而繁殖出人們所期望性別后代的一種繁殖新技術(shù)。奶牛XY精子分離性別控制技術(shù)是指將牛的精液根據(jù)含X染色體和Y染色體精子的DNA含量不同而把這兩種類型的精子有效的進(jìn)行分離后，將含X染色體的精子分裝冷凍后，用于牛的人工授精，而使母牛懷孕產(chǎn)母牛犢的技術(shù)；這種根據(jù)精子X、Y染色體的不同而分裝冷凍的凍精就叫性控凍精；使用我公司的牛性控凍精產(chǎn)品對(duì)發(fā)情母牛進(jìn)行配種可以使90%以上的受配懷孕母牛產(chǎn)母牛犢。液氮罐

一、奶牛性控凍精在生產(chǎn)中使用的重要意義

（一）奶牛公、母犢牛的價(jià)格差一般在1000元以上，母牛同樣的飼養(yǎng)管理成本和懷孕時(shí)間，用性控凍精冷配，可以使懷孕母牛的產(chǎn)犢效益顯著提高。

（二）使用性控凍精可以顯著的提高母牛數(shù)和群體產(chǎn)奶量，這是因?yàn)榕c常規(guī)冷凍精液配種相比，使用性控凍精，可以大量的繁殖出母牛后代，終使母牛數(shù)和產(chǎn)奶量都得到提高，從而提高生產(chǎn)效益。

（三）使用性控凍精可繁殖出大量的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生產(chǎn)效率。

以上三點(diǎn)都說明在使用性控凍精后可以顯著的提高奶牛產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)效益，同時(shí)與胚胎工程技術(shù)的結(jié)合可以使牛的品種改良一步到位。

二、性控凍精的特點(diǎn)

（一）解凍后精子活力要比常規(guī)冷凍精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分選時(shí)被篩除；

（二）性控凍精細(xì)管分裝精子的密度顯著地低于非性控凍精（性控：230萬個(gè)/0.25ml，非性控：2500萬個(gè)/0.25ml）；

（三）奶牛含X染色體性控冷凍精液的存活時(shí)間相對(duì)于常規(guī)冷凍精液要短。

三、使用性控凍精進(jìn)行人工授精的母牛的選擇按下列步驟和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

首先是品種的選擇，選擇中、高產(chǎn)奶牛及其后代做為使用對(duì)象；其次是年齡和胎次，首選初配母牛和生產(chǎn)三胎內(nèi)母牛；最后是營(yíng)養(yǎng)和健康，膘情適中健康無疾病和繁殖疾病史。

四、性控凍精輸精技術(shù)的操作要點(diǎn)和注意事項(xiàng)

（一）準(zhǔn)確的發(fā)情觀察（步驟）

1、每天早晚對(duì)放牧或在運(yùn)動(dòng)場(chǎng)運(yùn)動(dòng)牛群進(jìn)行至少半小時(shí)的觀察，記錄接受爬跨的牛號(hào)；

2、不能放牧或不能在運(yùn)動(dòng)場(chǎng)運(yùn)動(dòng)的牛，等到牛吃草擠奶后靜臥休息時(shí)，觀察其尾部分泌物的粘性和顏色，記錄牛號(hào)；

3、對(duì)外陰紅腫爬跨其它牛只騷動(dòng)不安的牛只記錄牛號(hào)；

4、對(duì)上述三種情況記錄的牛只在觀察完成后立即查閱繁殖記錄，剔除產(chǎn)后時(shí)間不合適、正在進(jìn)行繁殖疾病治療和其它不適合進(jìn)行配種的牛只；

5、對(duì)觀察到上述癥狀的適合冷配的空懷牛只，在10-12小時(shí)后進(jìn)行直腸檢查，首先判斷子宮的大小和質(zhì)地，然后檢查兩側(cè)卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根據(jù)卵泡的大小和質(zhì)地推測(cè)排卵時(shí)間，判斷在8小時(shí)之內(nèi)排卵并適合進(jìn)行冷配的牛只立即進(jìn)行配種，對(duì)適合使用性控凍精的牛只（本手冊(cè)第三條）用性控凍精配種，不適合的用常規(guī)凍精配；并做好包括子宮、卵巢情況和發(fā)情時(shí)間及輸精時(shí)間和部位等內(nèi)容的詳細(xì)記錄；

（二）輸精操作要點(diǎn)

1、使用性控凍精配種時(shí)，配種時(shí)間盡量控制在排卵前6小時(shí)之內(nèi)或排卵后4小時(shí)之內(nèi)；使用性控凍精時(shí)，盡量縮短解凍與輸精之間的時(shí)間，好是解凍一支輸一支；

2、解凍方法：從液氮罐中取凍精時(shí)，提漏中的凍精不可超過液氮罐口，如果10秒鐘內(nèi)還沒有將凍精取出，應(yīng)將凍精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重復(fù)操作；單支凍精取出后在空氣中先停留5秒左右，然后放入38-40攝氏度清水中10秒中后取出用干脫脂棉擦干后剪斷封口，裝入輸精器準(zhǔn)備輸精；

3、輸精器好是使用一次性外套的，輸精時(shí)要保證輸精器的無菌和與輸精器接觸的部位及器具的干凈衛(wèi)生；輸精部位一般在排卵側(cè)子宮角或者是采用子宮體后拉法，也就是說，如果能夠準(zhǔn)確判斷出排卵側(cè)并能使輸精器順利的放到排卵側(cè)子宮角就采用子宮角輸精，否則，采用子宮體輸精器后拉發(fā)法輸精，保證兩側(cè)子宮角都能有精子進(jìn)入和受精。

（三）跟蹤觀察

1、對(duì)于已經(jīng)參加配種的牛只，在8小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行第二次直腸檢查卵泡側(cè)；如果已經(jīng)確認(rèn)排卵，做好配種記錄；沒有排卵的參配牛只采取補(bǔ)救措施，本條第（四）；

2、其它適合配種的牛只重復(fù)本手冊(cè)第四條第（一）的第5步操作程序。

3、配種后在下個(gè)情期繼續(xù)觀察是否有發(fā)情表現(xiàn)，如果受配母牛連續(xù)兩個(gè)情期以上沒有發(fā)情，在配種60天后，直腸檢查確定是否妊娠；對(duì)于沒有妊娠的母牛采取補(bǔ)救措施---本條第（四）；

（四）補(bǔ)救措施

1、在冷配8小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行第二次直腸檢查卵泡側(cè)，對(duì)于沒有排卵的參配牛只，在推斷了排卵時(shí)間后要繼續(xù)適時(shí)輸精，并根據(jù)具體情況結(jié)合外源激素的使用。此類情況不妊娠與性控凍精的質(zhì)量無關(guān)，主要是發(fā)情母牛的排卵時(shí)間與人工授精的時(shí)間沒有掌握好。

2、參配母牛在配種后的第一或第二情期觀察到了明顯的發(fā)情表現(xiàn)，在確認(rèn)發(fā)情后要及時(shí)進(jìn)行重復(fù)冷配，冷配時(shí)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)情黏液不干凈或其它繁殖疾病，要停止冷配并采取相應(yīng)的治療措施；如果對(duì)排卵時(shí)間把握不準(zhǔn)確，就采用常規(guī)凍精進(jìn)行復(fù)配。

五、合格冷配技術(shù)員的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)

1、耐心的、準(zhǔn)確的發(fā)情觀察和鑒定：主要是通過外觀觀察包括是否接受爬跨和黏液等，最終通過直腸檢查卵巢是否有排卵卵泡來確定是否發(fā)情和什么時(shí)間輸精。－－如果能做到這一點(diǎn)可以得到30分

2、直腸把握輸精器能熟練通過牛的子宮頸并在整個(gè)操作過程中做到無菌操作。－－如果能做到這一點(diǎn)可以得到30分

3、繁殖疾病的及時(shí)發(fā)現(xiàn)和及時(shí)、有效的預(yù)防與治療的能力（激素使用）冷配技術(shù)人員在人工授精操作之外能夠及時(shí)的對(duì)適繁母牛做到包括子宮、卵巢和其它繁殖器官疾病的有效的預(yù)防和治療，充分的保證繁殖母牛在合適的妊娠時(shí)間妊娠。－－如果能做到這一點(diǎn)可以得到30分。

4、其它：認(rèn)真的做好繁殖記錄，凍精的保存、解凍和顯微鏡檢查活率的技能－－如果能做到這些可以得到10分

對(duì)以上四點(diǎn)熟練而系統(tǒng)的掌握的牛人工授精技術(shù)人員才算是一個(gè)技術(shù)精湛、在生產(chǎn)中能夠?yàn)轲B(yǎng)牛事業(yè)做出貢獻(xiàn)并為自己創(chuàng)造美好生活的人！液氮罐

六、影響人工授精受胎率的主要因素

（一）母牛自身的因素：母牛的健康狀況對(duì)受胎是非常重要的，健康的牛激素水平才正常，才能正常排卵和保證卵子的受精和維持胎兒的正常的發(fā)育，所以要想得到高的人工授精受胎率，保證繁殖母牛的健康和繁殖器官的健康是必須的；

（二）冷配技術(shù)人員的技術(shù)水平是能夠讓健康空懷母牛受胎率得到提高的必要條件（技術(shù)人員的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)說過了）；

（三）當(dāng)一個(gè)健康的適配母牛經(jīng)過一個(gè)高技術(shù)水平的人工受精員的冷配之后，仍然沒有懷孕或整個(gè)牛群的懷孕率依然很低時(shí)，就要考慮凍精的因素，主要是從凍精自身的活率是否很高和在保存及解凍過程是否出現(xiàn)了問題等環(huán)節(jié)逐個(gè)分析；所以為了避免凍精在使用和保存中出現(xiàn)問題，最好定期抽檢凍精的品質(zhì)，簡(jiǎn)單的就是采用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行檢查。

由此可見，在使用人工授精技術(shù)進(jìn)行配種時(shí)，凍精只是影響受胎率的一個(gè)因素，當(dāng)受配母牛的懷孕率較低時(shí)，我們要綜合分析，才能發(fā)現(xiàn)問題的原因和找到提高受胎率和情期受胎率的辦法。

七、同期發(fā)情技術(shù)的應(yīng)用

（一）適合進(jìn)行同期發(fā)情處理的牛：空懷，健康，產(chǎn)后時(shí)間合適，繁殖狀況正常，無繁殖疾??；

（二）目前可以讓牛同期發(fā)情的辦法很多，但在生產(chǎn)中方便實(shí)用的是以下兩種方法。

方法一：直檢有黃體時(shí)，直接采用PG肌注或?qū)m注，此方法可使處理母牛在處理后72小時(shí)的發(fā)情排卵率達(dá)到70%以上；

方法二：對(duì)于卵巢靜止和無黃體的母牛，采用放置CIDR在9天后于撤出CIDR時(shí)注射PG，兩天后開始觀察發(fā)情并根據(jù)發(fā)情情況適時(shí)配種；或者間隔11天兩次肌注PG的方法；在第二次注射PG兩天后開始觀察發(fā)情并根據(jù)發(fā)情情況適時(shí)配種。

八、常見繁殖疾病的預(yù)防和治療原則

（一）子宮疾病的臨床診斷和治療原則

1、外觀觀察：尾部分泌物的顏色、氣味，生殖器官的外部形狀；發(fā)情時(shí)粘液的情況并結(jié)合產(chǎn)后時(shí)間來與正常情況對(duì)比后做出初步的判斷；

2、直腸檢查：子宮的大小、質(zhì)地、是否對(duì)稱等從形狀和質(zhì)地的比較并結(jié)合外觀觀察來終得出診斷結(jié)論；

3、預(yù)防為主：首先，保持牛床環(huán)境衛(wèi)生的清潔；其次，清洗子宮和輸精時(shí)做好無菌工作，不重復(fù)使用已經(jīng)污染的器具，避免交叉感染；最后，對(duì)產(chǎn)后的母牛的生殖系統(tǒng)做好及時(shí)的保健和預(yù)防及治療。

4、治療方法（對(duì)因、對(duì)癥）：沖洗，子宮注射，全身癥狀的消除；

5、常用藥物：消毒防腐、抗生素、激素和中草藥治療。

（二）卵巢機(jī)能性障礙的臨床診斷和治療原則

1、通過發(fā)情周期和發(fā)情時(shí)間、癥狀來判斷：周期是否固定時(shí)間是否正常、發(fā)情的持續(xù)時(shí)間、癥狀是否正常；

2、直腸檢查兩側(cè)卵巢：大小、質(zhì)地是否正常，通過以上兩點(diǎn)來診斷卵巢機(jī)能是否正常；

3、卵巢囊腫、卵泡囊腫的治療原則：采用物理方法、抗生素、激素的使用來治療；

4、排卵延遲的治療原則：調(diào)整輸精時(shí)間和使用激素，激素一般采用肌注促排2號(hào)和促排3號(hào)；

5、卵泡閉鎖和交替發(fā)育的治療原則：加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和使用外源生殖激素。液氮罐